成人在线视频国产,伊人伊狠亚洲综合影院,亚洲国产天堂久久综合,欧美国产日韩综合

     近日，中國科學(xué)院南海海洋研究所張長(cháng)生研究員團隊和廈門(mén)大學(xué)王斌舉教授團隊合作在氮雜蒽醌類(lèi)海洋多環(huán)天然產(chǎn)物Deoxynybomycin（DNM）和Nybomycin（NM）生物合成與酶反應機制研究方面取得新進(jìn)展，相關(guān)成果 “Deciphering Deoxynybomycin Biosynthesis Reveals Fe(II)/α-Ketoglutarate Dependent DioxygenaseCatalyzed Oxazoline Ring Formation and Decomposition”在線(xiàn)發(fā)表于Journal of the American Chemical Society (《美國化學(xué)會(huì )志》)。博士后劉凱、張錦巖（廈門(mén)大學(xué)），博士張光濤為共同第一作者，張長(cháng)生、王斌舉與張光濤為共同通訊作者。

　　惡唑啉是天然藥物中的重要活性基團，在有機合成小分子活性化物結構衍生和修飾中有著(zhù)廣泛應用。2-惡唑啉環(huán)是自然界中常見(jiàn)的結構形式，其在非核糖體肽、核糖體肽和苯并惡唑類(lèi)天然產(chǎn)物中的生物合成途徑已經(jīng)闡明。抗生素DNM和NM是自然界中罕見(jiàn)的含有4-惡唑啉基團的氮雜蒽醌類(lèi)化合物。DNM具有顯著(zhù)抗革蘭氏陽(yáng)性菌活性，也是開(kāi)發(fā)抗革蘭氏陰性菌的藥物先導化合物，其作用機制是與DNA Ⅱ型拓撲異構酶靶向結合，阻礙細菌DNA合成而發(fā)揮抗菌作用。DNM中的4-惡唑啉環(huán)是關(guān)鍵藥效團，但其生物合成機制一直是未解之謎，限制了對這類(lèi)活性氮雜蒽醌天然產(chǎn)物的深度挖掘和開(kāi)發(fā)利用。 

　　研究團隊早期從南海深海沉積物來(lái)源的假諾卡氏菌（Pseudonocardia antitumoralis SCSIO 01299，張偲院士和田新朋研究員提供）分離發(fā)現了氮雜蒽醌類(lèi)多環(huán)天然產(chǎn)物脫氧苯醌（Deoxynyboquinone，DNQ）（Mar Drugs, 2011,9:1428-1439）。近期，與澳門(mén)大學(xué)副教授余華合作揭示了DNQ的抗炎活性靶點(diǎn)與作用機理，發(fā)現DNQ可靶向烷基化修飾信號通路(Keap1-Nrf2-ARE)中Keap1上的關(guān)鍵位點(diǎn)Cys489，促使Keap1泛素化，并釋放Nrf2進(jìn)入細胞核激活下游抗炎效應因子的表達，從而發(fā)揮顯著(zhù)的抗炎活性（J. Pharm. Anal. 2023, doi:10.1016/j.jpha.2023.07.009）。 

　　DNM與DNQ擁有相似的三環(huán)氮雜蒽醌線(xiàn)性骨架結構，可能具有相同的生源途徑。本研究基于生物信息學(xué)分析定位了菌株SCSIO 01299和Embleya hyaline NBRC 13850（DNM產(chǎn)生菌）基因組中DNQ（dnq）和DNM（dnm）的生物合成基因簇（圖1），進(jìn)一步通過(guò)體內遺傳與體外生化實(shí)驗，發(fā)現了二者生物合成途徑中的共同中間體5（圖2），闡明了甲基轉移酶DnmS負責DNQ和DNM氮甲基化后修飾，兩個(gè)同源的Fe(II)/α-KG依賴(lài)型雙加氧酶DnmT和DnmU分別負責DNM中4-惡唑啉環(huán)的形成和C-12位的羥基化（圖2）。 

　　圖1. 氮雜蒽醌類(lèi)天然產(chǎn)物與其生物合成基因簇 

　　在進(jìn)行體外酶反應研究時(shí)，研究團隊意外發(fā)現DnmT既能催化惡唑啉環(huán)的形成產(chǎn)生DNM，也能催化DNM中惡唑啉環(huán)的開(kāi)環(huán)和脫N-甲基，最終形成中間體5，從而逆轉DNM的生物合成。為闡釋DnmT催化惡唑啉成環(huán)與開(kāi)環(huán)的酶學(xué)基礎，研究團隊基于酶蛋白建模、點(diǎn)突變以及分子動(dòng)力學(xué)（MD）模擬和量子力學(xué)/分子力學(xué)（QM/MM）多尺度計算化學(xué)等方法詳細解析了DnmT催化成環(huán)、開(kāi)環(huán)和脫甲基反應的新穎酶學(xué)機制，同時(shí)通過(guò)體外實(shí)驗捕捉到反應中間體14，進(jìn)一步佐證了該反應機理的合理性（圖2）。 

　　圖2. Fe(II)/α-KG依賴(lài)型雙加氧酶DnmT催化惡唑啉成環(huán)、開(kāi)環(huán)和脫甲基化反應的機制 

　　此外，研究團隊還初步探索了DnmT催化多種反應的生物學(xué)意義。進(jìn)一步發(fā)現，在野生菌株中，絕大部分DNM被分泌至胞外，而胞內含量較少；活性評估顯示，DNM對革蘭氏陽(yáng)性菌的抑菌活性顯著(zhù)強于NM及其它中間體和副產(chǎn)物。由此，研究團隊推測，DnmT催化惡唑啉成環(huán)產(chǎn)生DNM并釋放到環(huán)境中，殺死自己的競爭者，提升自身的生存能力；而催化惡唑啉開(kāi)環(huán)和脫甲基可能是為了控制胞內DNM的濃度，減少對細菌自身的毒性，這一假設有待進(jìn)一步的深入研究證實(shí)。 

　　綜上所述，本研究解析了抗生素DNM中罕見(jiàn)4-惡唑啉藥效團的合成途徑，并利用酶學(xué)和計算化學(xué)等方法揭示了新穎多功能Fe(II)/α-KG依賴(lài)型雙加氧酶DnmT催化惡唑啉成環(huán)、開(kāi)環(huán)和脫甲基化的酶學(xué)機制，為Fe(II)/α-KG依賴(lài)型雙加氧酶在天然產(chǎn)物生物合成中的功能多樣性以及其可能的生物學(xué)意義提供了新見(jiàn)解，同時(shí)也為活性氮雜蒽醌類(lèi)天然產(chǎn)物的基因組挖掘提供了重要科學(xué)依據。 

　　上述研究工作得到了國家自然科學(xué)基金、廣東省海洋經(jīng)濟發(fā)展（海洋六大產(chǎn)業(yè)）專(zhuān)項資金、海南省重大科技計劃和中國科學(xué)院王寬誠率先人才計劃“盧嘉錫國際團隊項目”等的資助。 

　　相關(guān)論文信息：1、Kai Liu#, Jinyan Zhang#, Guangtao Zhang#,*, Liping Zhang, Zhen Meng, Liang Ma, Wenjun Zhang, Weiliang Xiong, Yiguang Zhu, Binju Wang*, Changsheng Zhang*. Deciphering deoxynybomycin biosynthesis reveals Fe(II)/α-ketoglutarate-dependent dioxygenase-catalyzed oxazoline ring formation and decomposition. J. Am. Chem. Soc. 2023. https://doi.org/10.1021/jacs.3c11772 

　　2、Ke-Gang Linghu, Tian Zhang, Guangtao Zhang, Peng Lv, Wenjun Zhang, Guanding Zhao, Shihang Xiong, Qiushuo Ma, Mingming Zhao, Meiwan Chen, Yuanjia Hu, Changsheng Zhang*, Hua Yu*. Small molecule deoxynyboquinone triggers alkylation and ubiquitination of Keap1 at Cys489 on Kelch domain for Nrf2 activation and inflammatory therapy. J. Pharm. Anal. 2023. doi: 10.1016/j.jpha.2023.07.009